O teste de vitamina D é comumente solicitado para a avaliação de várias condições de saúde e em indivíduos com fatores de risco específicos. As razões primárias incluem doenças ósseas como osteomalácia, osteoporose e doença de Paget, sintomas musculoesqueléticos, exposição solar insuficiente, obesidade, gestações frequentes ou mães amamentando, e o uso de certos medicamentos. Além disso, este teste é importante para o monitoramento de condições crônicas como fibrose cística, esclerose múltipla (EM), colite ulcerativa e doença de Crohn. O monitoramento dos níveis de vitamina D também é recomendado para indivíduos em idade avançada e durante a menopausa.