D vitamini testi, çeşitli sağlık durumlarının değerlendirilmesi ve belirli risk faktörlerine sahip bireylerde yaygın olarak istenmektedir. Başlıca nedenler arasında osteomalazi, osteoporoz ve Paget hastalığı gibi kemik hastalıkları, kas-iskelet sistemi belirtileri, yetersiz güneş ışığına maruz kalma, obezite, sık aralıklarla gebelik veya emzirme durumları ve belirli ilaçların kullanımı bulunmaktadır. Ayrıca kistik fibrozis, multipl skleroz (MS), ülseratif kolit ve Crohn hastalığı gibi kronik durumların takibinde de bu test önemlidir. İleri yaş ve menopoz dönemindeki bireylerde de D vitamini seviyelerinin izlenmesi önerilir.