चौगुनी स्क्रीनिंग टेस्ट आमतौर पर तब किया जाता है जब गर्भावस्था की देखभाल दूसरी तिमाही में शुरू होती है, या यदि पहली तिमाही की स्क्रीनिंग (रक्त परीक्षण और अल्ट्रासाउंड जांच सहित) नहीं की गई थी। यह परीक्षण मां के रक्त में चार विशिष्ट मार्करों के स्तर को मापता है ताकि कुछ गुणसूत्र संबंधी असामान्यताओं और तंत्रिका नली दोषों के जोखिम का आकलन किया जा सके। मापे गए मार्कर हैं:

* अल्फा-भ्रूणप्रोटीन (एएफपी): विकासशील बच्चे द्वारा उत्पादित एक प्रोटीन।
* मानव कोरियोनिक गोनाडोट्रोपिन (एचसीजी): प्लेसेंटा द्वारा उत्पादित एक हार्मोन।
* एस्ट्रिओल (E3): प्लेसेंटा और बच्चे के यकृत द्वारा उत्पादित एक हार्मोन।
* इन्हिबिन ए: प्लेसेंटा द्वारा उत्पादित एक और हार्मोन।