O diagnóstico pré-natal da espinha bífida é possível. Durante os exames pré-natais de rotina, os exames de ultrassom podem detectar estruturas císticas características ou outras anormalidades estruturais específicas da espinha bífida. Além disso, em casos de preocupações sobre o desenvolvimento fetal ou excesso de líquido amniótico (polidrâmnio), a análise do líquido amniótico também pode ser realizada para auxiliar no diagnóstico.