La manométrie œsophagienne est la méthode de référence (gold standard) pour le diagnostic de l'achalasie. Cette étude révèle une pression élevée du sphincter œsophagien inférieur (SOI) et une relaxation insuffisante pendant la déglutition. Des méthodes complémentaires telles que l'œsophagographie (transit œsophagien baryté) et l'endoscopie sont également utilisées dans le processus diagnostique. L'œsophagographie montre typiquement une dilatation de la partie supérieure de l'œsophage et un rétrécissement distal caractéristique en "bec d'oiseau". L'examen endoscopique révèle une résistance significative au niveau du sphincter œsophagien inférieur ; l'œsophage apparaît rétréci distalement, et des modifications secondaires dues à la stase chronique, comme l'œsophagite fongique, peuvent parfois être observées.