Die pränatale Diagnose von Spina bifida ist möglich. Während der routinemäßigen Schwangerschaftsvorsorgeuntersuchungen können Ultraschalluntersuchungen charakteristische zystische Strukturen oder andere strukturelle Anomalien, die spezifisch für Spina bifida sind, erkennen. Zusätzlich kann bei Bedenken hinsichtlich der fetalen Entwicklung oder einem Überschuss an Fruchtwasser (Polyhydramnion) eine Fruchtwasseranalyse durchgeführt werden, um die Diagnose zu unterstützen.