स्पाइना बिफिडा का गर्भावस्था के दौरान निदान संभव है। नियमित प्रसवपूर्व जांच के दौरान, अल्ट्रासाउंड परीक्षण स्पाइना बिफिडा के लिए विशिष्ट सिस्टिक संरचनाओं या अन्य संरचनात्मक असामान्यताओं का पता लगा सकते हैं। इसके अतिरिक्त, यदि भ्रूण के विकास के बारे में चिंताएं हों या एमनियोटिक द्रव (पॉलीहाइड्रामनिओस) की अधिकता हो, तो निदान में सहायता के लिए एमनियोटिक द्रव विश्लेषण भी किया जा सकता है।